Northern Sea Cucumber (Cucumaria frondosa): A Potential Candidate for Functional Food, Nutraceutical, and Pharmaceutical Sector–National Library of Medicine
概述
海參（Cucumaria frondosa）是北大西洋寒冷水域中生长的软体物種。C. frondosa含有廣泛的生物活性化合物，主要有膠原蛋白、腦苷脂、糖胺聚醣、硫酸軟骨素、皂苷、酚類和粘多醣等，具有獨特的生物學和藥理特性。特別是，這種海洋無脊椎動物的體壁是主要的可食用部分，含有大部分活性成分，主要是多醣和膠原蛋白，具有多種生物活性，包括抗癌、抗高血壓、抗血管生成、抗炎、抗糖尿病等、抗凝血、抗菌、抗氧化和抗破骨細胞生成特性。特別是，三萜糖苷（frondoside A 和其他）由於其潛在的抗癌活性而成為研究最多的化合物組。這篇綜述總結了關於C. frondosa的最新信息，主要是地理分佈、加拿大海岸線特有的著陸點、加工、商業產品、貿易市場、生物活性化合物以及功能性食品和保健品方面的潛在健康益處。
一、簡介
海參屬於海參綱和棘皮動物門；它在全球範圍內都存在於深海和海底區域。由於具有多種生物活性，已在中國、韓國、日本、馬來西亞、印度尼西亞和俄羅斯廣泛食用。它有堅韌的皮膚和柔軟的圓柱形身體，包含一個分枝的性腺。海參含有極低的脂肪和膽固醇，但蛋白質含量很高 [ 1 ]。全世界發現了大約 1500 種海參 [ 2 ]，其中大約 100 種是眾所周知的供人類食用的 [ 3 ]。最重要的商業物種是刺參、Acaudina molpadioides、Actinopyga mauritiana、Cucumaria frondosa、Cucumaria japonica、Holothuria forskali、Holothuria polii、Holothuria nobilis、Holothuria tubulosa、Isostichopus badionotus和Pearsonothuria graeffei。在北太平洋和北大西洋地區發現的最常見的海參是Cucumaria frondosa、 Parastichopus californicus、Cucumaria japonica和Parastichopus parvimensis。尤其是Cucumaria frondosa被稱為橙足海參，是加拿大東海岸數量最多、分佈最廣的物種。
海參因其潛在的治療益處和作為海洋食品而受到更多關注。此外，由於其具有藥用特性的生物活性化合物的可用性，它作為功能性食品成分越來越受到關注。海參具有令人印象深刻的營養成分，包括蛋白質（主要是膠原蛋白）、脂質（主要是 omega-3 和 omega-6 脂肪酸）、維生素 A、B1（硫胺素）、B2（核黃素）、B3（菸酸）和礦物質，主要是鎂、鋅、鈣和鐵[ 4、5、6、7、8 ]。此外，它含有多種生物活性化合物，即皂苷 [ 9 ]、糖胺聚醣 [ 10 ]、硫酸軟骨素 [11 ]、硫酸化多醣[ 12、13 ] 、褐藻糖膠[ 14、15 ] 、酚類[ 16 ]、肽[ 17 ]、凝集素[ 18 ]、腦苷脂[ 19、20 ]、甾醇[ 21 ]，以及歐米茄– 3 和 omega-6 脂肪酸 [ 22 ]。因此，在東亞，它已被用作滋補食品和民間藥物來治療多種疾病。
東亞消費者認為海參是最奢侈、最有營養的食物，並將其作為傳統藥物來治療高血壓、風濕病、哮喘、割傷和燒傷、關節痛、背痛、傷口損傷、腎臟問題、生殖障礙、陽痿、和便秘 [ 1 , 23 ]。從不同海參中分離出的化合物具有獨特的生物學和藥理學特性，例如抗癌 [4、24、25 ]、抗血管生成 [ 26 ]、抗凝血[ 10、27、28 ]、抗炎[ 29、30 ]、抗高血壓 [ 31]、抗菌 [ 32、33 ] 、抗血栓 [ 28 ]、抗氧化劑 [ 34、35 ] 、抗腫瘤 [ 29 ]以及傷口癒合活性 [ 36 ]。特別是，來自C. frondosa的糖胺聚醣顯示出類似肝素的抗凝血活性 [ 37 ]。此外，海參衍生的生物活性成分可以作為新型化妝品成分應用於口腔、面部、手、足、頭髮、指甲、關節、頭皮和不同敏感的身體部位[ 38 ]]. 此外，從海參體壁中提取的干片在亞洲和美國被廣泛用於生理和營養益處，特別是用於改善性能力 [ 5 ]。此外，馬來西亞人食用海參皮提取物來治療高血壓、哮喘、傷口癒合、割傷和燒傷[ 39、40 ]。儘管人們對海參的興趣和需求不斷增長，但與其他物種相比，尚未充分探索海參作為營養保健品和功能性食品成分的潛在用途。
據我們所知，這是第一篇試圖總結橙足海參 ( Cucumaria frondosa ) 生物活性化合物及其功能最新研究狀況的文獻綜述。它還討論了C. frondosa的營養、生物學和藥理學特性，以強調其在功能性食品和保健品中的潛在用途。此外，還介紹了加拿大海岸線、加工、商業產品和貿易市場特有的C. frondosa的生長和分佈以及上岸量的概況。此外，還概述了橙足海參中存在的生物分子的提取、分離和分析。
2. 描述、增長和分佈
橙足海參（C. frondosa）廣泛分佈於北大西洋，主要分佈在近岸地區，以及俄羅斯聯邦沿岸的巴倫支海。它們身體柔軟，像黃瓜，皮膚堅韌，細長，像蠕蟲一樣的身體。嘴巴在身體的一端被水咽球莖/觸鬚/花包圍，在另一端被肛門包圍（圖1). 它可以長到最大長度為 40-50 厘米，寬度為 10-15 厘米，重量為 100-500 克。體壁是該物種的主要部分（高達總體重的 50%），其中含有約 85% 的水分。一般情況下，海參吃的是泥漿或死顆粒殘骸；然而，C. frondosa通過展開它們的觸鬚以浮游植物、浮游動物和有機物為食[ 41、42 ]。
有趣的是，這個物種可以非常快地再生或更新自己，並且它們可能有能力恢復失去的器官 [ 43 ]。海參的皮膚中含有膠原蛋白（棘皮動物膠原蛋白），因此它們能夠非常迅速地改變其機械狀態（液體/果凍到固體形式）[ 44 ]，因此，將其用作一種可能的防禦機制。此外，假設它們通過數千個微小的管足來控制它們的運動，並通過在水中傳遞激素信號來相互交流。由於其物理特徵的可塑性，包括長度、重量和年齡在內的形態計量學很難確定 [ 45 ]。一般來說，C. frondosa（橙足海參）、南瓜或鳳凰海參於 5 月至 11 月在加拿大大西洋地區收穫。此外，與其他海參品種相比，C. frondosa的生長速度較慢，平均每月生長 2 毫米。此外，生長速率取決於溫度、光照、鹽度、深度和擾動程度 [ 46 ]。然而，由於體積小和體壁薄，與其他商業海參相比，葉狀海參仍被認為是低檔產品 [ 47 ]。
C. frondosa的分佈範圍從加拿大東海岸（海灣從潮汐下限到最深區和聖勞倫斯河口），新英格蘭西南海岸，下至北歐海岸，冰島南部，以及格陵蘭、斯堪的納維亞和法羅群島的海岸（圖 2). 特別是，從低潮間帶和冷潮池到低至 1000 英尺的潮下水域以及從北極到科德角都發現了它。這些海參在強水流和深度區域（30 至 300 米）最為豐富，它們更喜歡生活在岩石（珊瑚和海藻）或混合基質（石頭、沙子、礫石和貝殼）中 [ 48 , 49 , 50 ]。
3. 加拿大上岸、加工、商業產品和貿易市場
根據加拿大漁業和海洋部 (DFO) 的數據[ 51 ]，大西洋和太平洋沿岸的海參商業上岸量在過去十年中翻了一番 (圖 3). 特別是，從 2008 年到 2017 年，紐芬蘭和拉布拉多的數量增加了五倍多（698 到 3707 公噸）。此外，從 2008 年到 2017 年，加拿大上岸量從 4516 公噸增加到 9922 公噸，價值 1830 萬美元（圖 4). C. frondosa棲息在紐芬蘭和拉布拉多 (NL) 附近海域最深 100 米處。2003 年，根據新興漁業政策，在聖皮埃爾河岸建立了一家海參拖曳漁業。最初分配量為454噸，2005年增加到612噸，2010年增加到907噸，2013年增加到2242噸[ 42 ]。2017 年，紐芬蘭和拉布拉多貢獻了加拿大海參總上岸量的 37.36%（3707 公噸），收入達 400 萬美元。
海參在收穫後的儲存和運輸是一項具有挑戰性的任務，因為它能夠在從海水中取出或在壓力下自溶。自溶是一種生理過程，其中體壁/真皮通過蛋白質分解（內源性蛋白酶）降解，這可能導致肉的質地和感官特性發生變化 [ 52 ]。一般來說，海參在收穫後立即放入海水/冰/鹽中。Gianasia、Hamel 和 Mercier [ 52] 報告說冰鎮海水提供了最好的儲存條件，而常見的傳統方法，包括冰凍和鹽醃，死亡率和皮膚壞死率最高。此外，消化道在收穫後分泌各種酶，主要是胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和組織蛋白酶，它們參與水解體壁的主要成分之一（膠原蛋白）[ 53 ]，從而導致體壁和最終產品質量的損失。隨著蛋白質分解、脂質氧化和酶分泌，新成分的開發改變了海參的顏色、風味、氣味和質地，並導致經濟損失 [ 52 ]。
海參加工步驟包括去內臟和去內臟，然後是清洗和冷凍/蒸煮/乾燥。體壁是海參的初級產品；有時縱肌（簡稱肉）也與體壁分離。一些行業單獨分離觸鬚（花）並以乾燥形式出售；但是，內部器官被視為加工廢物。最常見的大西洋海參產品是蝴蝶切（帶皮/不帶肉，幹的或冷凍的）、繭切（帶肉的，幹的或冷凍的）、切片的皮膚（冷凍/乾燥）和生肉（冷凍）（圖 5). 有時，單獨速凍 (IQF) 用於在漂燙後儲存整個海參。蝶形切割工藝包括沿體壁切割黃瓜以去除內臟（內臟），將所得海參“展開”，形成蝴蝶狀。另一方面，繭切割過程包括切掉花朵以創建用於內臟的開口。可以通過設計獨特的清潔工具或使用真空吸塵器來完成內臟處理。由於其細長且未損壞的管狀形狀（個人交流和參觀當地海參產業），繭切在世界市場上比蝴蝶切（縱向切）具有更高的價值。
C. frondosa以冷凍、熟鹽醃、熟乾和熟鹽幹形式出口到世界市場。然而，全球貿易市場大部分以乾品形式銷售，少量以冷凍和新鮮產品形式銷售。大約 90% 的貿易發生在中國、香港、日本、韓國和新加坡。從寒冷和北極水域捕撈的野生海參在亞洲市場比主要來自熱帶和溫暖水域的水產養殖海參具有更大的價值。根據體壁厚度、質地、皮膚顏色和加工完整性，乾海參的價值可能相差很大，每公斤價格從 40 美元到 360 美元不等。
4.近似構圖
迄今為止，很少有人對C. frondosa的近似成分進行過研究。從營養的角度來看，C. frondosa是一種理想的滋補食品，具有令人印象深刻的營養成分，如維生素、礦物質、碳水化合物、氨基酸和脂肪酸。Zhong、Khan 和 Shahidi [ 54]報導，新鮮整條海參的水分、蛋白質、脂質、灰分和碳水化合物的含量分別約為90.5%、5.5%、0.8%、3.5%和1.5%。存在必需和非必需氨基酸（其中 17 種）以及大量游離氨基酸。特別是，新鮮的整條海參含有谷氨酸（57.5 mg/g）、賴氨酸（30.6 mg/g）、亮氨酸（28.3 mg/g）、甘氨酸（29.8 mg/g）、天門冬酰胺（27.8 mg/g），以及含有相當數量的丙氨酸、精氨酸、脯氨酸和纈氨酸。然而，新鮮整條海參的氨基酸和脂肪酸含量低於去內臟的海參（表 2). 此外，與二十二碳六烯酸 (DHA) 相比，二十碳五烯酸 (EPA) 是海藻中的主要脂肪酸。另一方面，Mamelona、Saint-Louis 和 Pelletier [ 55 ] 指出，大西洋海參內臟含有大約 92.3% 的水分、4.5% 的蛋白質、2% 的脂肪、0.7% 的灰分和 0.3% 的碳水化合物。大多數必需和非必需氨基酸還含有大量谷氨酸、天冬氨酸和精氨酸。此外，大西洋海參內臟富含多不飽和脂肪酸（PUFA，約佔 44%），其中飽和脂肪酸（SFA）佔 24%，單不飽和脂肪酸（MUFA）佔 30%。C. frondosa的性腺和肌肉組織與其他身體部位相比，脂肪和脂肪酸（EPA 和 DHA）的含量明顯更高 [ 50 ]。他們還報告說，相當數量的脂質 (3.40 ± 0.28 mg/gw/w)；當C. frondosa以魚卵為食時，主要存在 DHA、棕櫚酸和 EPA 。然而，內臟含有高水平的必需元素（Cu、Fe、Zn、K、Na、Mn、As、Mg、Se、Ni 和 Ca）和極少量的非必需元素（Cd、Co 和 Pb）元素和維生素（菸酸、泛酸、α-生育酚、核黃素、硫胺素和葉酸）。這些礦物質刺激身體的新陳代謝，促進健康成長，並有助於降低血糖水平 [ 55 ]。因此，C. frondosa在海洋食品工業中，被認為是豐富的營養來源，包括維生素和礦物質。
5. 生物活性化合物及其提取和分離方法
橙足海參是具有藥用價值的潛在海洋資源之一。在C. frondosa中發現的最常見的生物活性化合物是三萜糖苷、多醣（岩藻糖基化硫酸軟骨素）、腦苷脂、皂苷、類胡蘿蔔素、膠原蛋白、酚類、多不飽和脂肪酸和其他生物活性化合物[ 5、56、57 ]。大西洋海參的主要生物活性化合物如下所示圖 7並在以下小節中解釋。此圖未指示第 6 節中所示的生物活性物質的位置。
5.1. 多醣
在過去的幾十年裡，對海洋生物進行了大量的研究，許多研究人員將注意力集中在源自海洋生物的多醣上。來自海洋生物的多醣具有潛在的健康益處，因此被用於食品、保健品、藥品和化妝品行業。海參因其廣泛的藥理和生物學活性最終成為多醣的主要來源之一。C. frondosa的體壁含有大量酸性多醣，特別是硫酸化多醣（岩藻糖基化硫酸軟骨素）[ 56 , 57]. 有趣的是，從海參中鑑定出的硫酸化多醣的結構不同於其他脊椎動物、無脊椎動物和藻類 [ 12 ]。在C. frondosa中鑑定出兩種類型的多醣：(a) 岩藻糖基化硫酸軟骨素和 (b) 岩藻聚醣 [ 57 , 58]. 岩藻糖基化硫酸軟骨素 (FCS) 是海參中發現的一種獨特的糖胺聚醣，其生物活性取決於單醣成分的硫酸化模式。糖胺聚醣 (GAG) 是硫酸化的、線性的、粘性的、潤滑的和帶負電荷的多醣，存在於哺乳動物和鳥類中。FCS 的生物活性取決於硫酸鹽的位置、硫酸化程度和分支沿骨架的分佈。然而，硫酸軟骨素 (CS) 由葡萄醣醛酸和N-乙酰化半乳糖胺的重複二糖單元組成，通過四糖鍵與蛋白質核心相連。CS 以硫酸軟骨素 A (CS-A) 的形式存在，它在N的O -4 處被硫酸化-乙酰半乳糖胺（GalNAc），GalNAc的O -6位CS-C，GalNAc的6位CS-D和葡萄醣醛酸（GlcA），GalNAc的4位和6位的CS-E，以及被稱為硫酸皮膚素的CSB (DS) (圖 8) [ 59 ]. Ustyuzhanina 等人。[ 57 ] 從C. frondosa的體壁中分離出岩藻糖基化的硫酸軟骨素，發現它由硫酸軟骨素 A 和 E 以及二糖重複單元組成 →3)-ẞ-D-GalNAc4S6S-(1→4)-ẞ- D-GlcA3S-(1→ 和 →3)- ẞ-D-GalNAc4S-(1 → 4)-ẞ-D-GlcA3S-(1→。他們還在C. frondosa中檢測到三種類型的分支；其中兩種是α-L-Fucp3S4S 和 α-L-Fucp2S4S 連接到GlcpA 殘基的O -3，而最後一個是全O-硫酸化 α-L-Fucp 連接到GalpNAc 殘基的O -6。另一方面，羽衣甘藍et al. [ 56 ] 指出，C. frondosa的單醣組成作為N-乙酰神經氨酸、N-乙酰半乳糖胺、N-乙酰葡糖胺、葡萄醣醛酸、甘露糖、岩藻糖、葡萄糖和半乳糖。
用於從海參中提取岩藻糖基化硫酸軟骨素 (FCS) 的方法包括許多步驟，例如化學水解、蛋白水解釋放 CS、DS 和其他 GAGs、蛋白質的去除和 CS 的回收、CS 的分級分離和純化CS。化學水解和蛋白水解消化可以通過使用 NaOH、半胱氨酸或鹽酸胍、非離子洗滌劑、季銨鹽（氯化十六烷基吡啶）、尿素、硫氰酸鉀或酒精溶液來實現，而 CS 的回收可以使用三氯乙酸來實現。CS 的純化是通過使用離子交換、凝膠過濾和尺寸排阻色譜法進行的。提取過程可概括為稀鹼-酶解（鹼溶液和木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、Alcalase、枯草桿菌蛋白酶或胃蛋白酶），60 ]。然而，最近已經建立了許多替代提取方法，例如應用高靜水壓力 [ 61 ]、過氧化氫和銅離子的組合 [ 62 ]、組織自溶 [ 63 ] 和60 Co 輻照 [ 64 ] 等。
5.2. 褐藻糖膠
褐藻糖膠是海參體壁最重要的生物活性成分之一。這種多醣由 L-岩藻糖和硫酸基組成。多醣的鏈構象對其生物活性和理化性質有實質性影響[ 65 ]。超過 20 種藻類褐藻糖膠已被檢驗並用於功能性食品行業 [ 66 ]。然而，據報導，海參褐藻糖膠具有抗血栓形成和抗凝血的特性 [ 67 ]、抑制破骨細胞生成 [ 68 ] 以及防止胃損傷 [ 69 ]。此外，Wang 等人。[ 70 ] 報導了來自C. frondosa的褐藻糖膠具有抗高血糖特性，可顯著降低空腹血糖和胰島素水平，並增加胰島素抵抗小鼠的胰島素和葡萄糖耐量。此外，有人提出，C. frondosa fucoidan 可用作飲食誘發的 2 型糖尿病的補充治療。另一方面，胡等人。[ 58 ]解釋說，C. frondosa褐藻糖膠顯著防止高脂高糖飲食損傷胰島，降低胰島素、腫瘤壞死因子（TNF）-α和血糖水平，並提高脂聯素水平。此外，他們提出它通過抑制線粒體途徑來防止胰島細胞凋亡。主要的提取方法是酶法水解，主要使用木瓜蛋白酶，其次是氯化十六烷基吡啶沉澱 [ 58 , 70 ]。Sepharose Q Fast Flow 柱用於純化粗硫酸化多醣。
5.3. 膠原
膠原蛋白是動物體內豐富的蛋白質，主要分佈在細胞外基質、真皮內層、肌腱、骨骼、軟骨、韌帶和其他結締組織中，支持細胞外框架的強度和柔韌性 [ 71 ]。而且，人體30%的蛋白質含量是膠原蛋白；動物來源的膠原蛋白廣泛用於食品、藥品和化妝品行業。通常，膠原纖維很難溶解，最常見的膠原形式是 I 型（原纖維膠原）[ 72 ]。然而，明膠是膠原蛋白的一種可溶性形式，它是通過膠原蛋白的部分水解獲得的 [ 71 ]]. 由於凝膠形成和水結合特性，明膠被廣泛應用於食品、製藥、化妝品和攝影行業，作為乳化劑、膠體穩定劑、發泡劑、微膠囊和可生物降解的成膜材料。目前提取膠原蛋白最常見的原料是豬皮（46%）、牛皮（29.4%）、豬骨和牛骨（23.1%）、水產動物（1.5%）[ 71 ]。由於食品安全和宗教限制，從豬和其他哺乳動物來源提取膠原蛋白仍然受到限制。牛的潛在口蹄疫和豬海綿狀腦病的爆發引起了注重健康的消費者的一些焦慮 [ 73]. 此外，從非宗教屠宰的奶牛和豬身上獲得的膠原蛋白/明膠不被穆斯林和猶太人接受。印度教徒也禁止從牛肉中提取膠原蛋白 [ 74 ]。因此，海洋資源由於不受這些限製而成為提取膠原蛋白的新趨勢。然而，很少有人研究從雞軟骨、鼠尾腱、袋鼠尾巴、馬腱、鴨腳、鱷魚骨和皮膚、羊皮、鳥腳、青蛙皮和一些海洋資源中提取膠原蛋白 [ 75 , 76 ] .
海參最有價值的可食用部分是體壁，約佔體重的 50%，主要由膠原蛋白和粘多醣組成。據報導，膠原蛋白是海參的主要蛋白質，體壁中約有 70% 的不溶性膠原纖維存在，而乾海參中的粗蛋白估計約佔其乾重的 83% [ 23 , 77 ]。海參中最豐富的膠原蛋白類型是棘皮動物的膠原原纖維和 I 型膠原蛋白，呈對稱紡錘形，長度較短 [ 7 , 78 ]。據報導，由於 I 型膠原蛋白的存在， C. frondosa可作為熱穩定膠原蛋白的良好來源（圖 9) [ 79 , 80 ]。此外，C. frondosa真皮的主要膠原蛋白形成與真皮中發現的主要 GAG 共價連接的 α1 三聚體。相比之下，發現C. frondosa的體壁含有不到百分之一的膠原蛋白（我們未發表的作品）。與其他物種（主要是泥漿或死顆粒）相比，這可能與該物種獨特的攝食習慣（主要是浮游植物、浮游動物和有機物）有關。通常，傳統方法和新方法都用於從海參中提取膠原蛋白。傳統方法包括化學水解（酸鹼水解）和酶解（胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶、無花果蛋白酶、蛋白酶 K、膠原酶、Neutrase、Alcalase、Protamex 或 Flavourzyme），而新方法包括超聲輔助和加壓液體提取程序。由於安全、經濟、節省時間和環保的方法。最後，膠原蛋白可以通過使用不同的色譜技術進行純化，例如尺寸排阻色譜、高效液相色譜 (HPLC) 和離子交換色譜。
5.4. 皂甙
皂苷是海參產生的三萜糖苷和次級代謝產物。它們廣泛分佈於植物、動物和海洋生物（海參和海綿）中[ 81 ]。皂苷在化學防禦和藥理活性中起著至關重要的作用。已從許多海參物種中鑑定和分類了大約 300 種三萜糖苷，這些三萜糖苷被命名為 holostane 和 nonholostane。皂苷（三萜糖苷）包含多達六個單醣的碳水化合物鏈，包括 D-木糖、D-葡萄糖、3 – O-甲基-D-木糖、3- O-甲基-D-葡萄糖和 D-奎諾糖。此外，從海參中鑑定出的約 60% 的三萜糖苷具有與碳水化合物鏈的單醣基團相連的硫酸基 [ 82 ]。
從海參中分離出的皂苷，通常稱為海參苷，被稱為海參苷A。海參屬植物中含有多種三萜糖苷，主要有海參A、海參B、海參C、海參C、海參A 2 -1、 frondoside A 2 -2, frondoside A 2 -3, frondoside A 2 -4, frondoside A 2 -6, frondoside A 2 -7, frondoside A 2 -8, frondoside A 7 -1, frondoside A 7 -2, frondoside A 7 -3，和葉狀花苷 A 7 -4 (圖 10) [ 82 , 83 , 84 , 85 , 86 , 87 , 88 , 89 ]。此外， C . frondosa包含非常複雜的單硫酸化葉苷 A、二硫酸化葉苷 B 和三硫酸化葉苷C的混合物[ 83、84、85、86、87、88 ]。此外，Findlay 等人。[ 85 ] 報導了C. frondosa中的主要皂苷是frondoside A。他們還發現了三種新的低聚醣，即frondoside B、frondoside D和二聚五糖frondecaside。Yayli [ 86 ] 對來自C. frondosa的其他三種次要皂苷進行了分類，即 frondoside F、frondoside E 1和 frondoside E 2，儘管 Kalinin 等人。[ 87 ] 指出，這些糖苷和 frondecaside 的結構尚不確定。這些化合物表現出多種生物學特性，包括抑制細胞生長、溶血、抗病毒、抗原生動物、抗真菌、抗癌、抗腫瘤和抗腫瘤活性[ 26、90 ]]. 皂苷已通過多種技術純化，包括使用多種溶劑的液液萃取、高效液相色譜 (HPLC)、固相萃取或色譜法（樹脂或矽膠）。最後，使用1 H NMR 和13 C NMR 光譜來鑑定寡糖部分的結構[ 86、88 ]。
5.5. 酚類化合物
酚類化合物是強大的抗氧化劑，廣泛分佈於植物、海藻和海洋無脊椎動物中。它們作為有益的抗氧化劑保護人體免受許多慢性疾病的影響一直受到特別關注。這些化合物部分決定了食物的風味、顏色、苦味、澀味和營養價值[ 91、92 ]。一般來說，植物性食品所含的抗氧化劑是動物性食品的 60 倍左右。然而，海參，尤其是海參，即使是一種動物物種，也含有大量具有中等抗氧化活性的酚類物質[ 16、54、93、94, 95 ]。由於從浮游植物中吸收酚類物質，海洋無脊椎動物可能是酚類物質的豐富來源，包括類黃酮、花青素、花青素和單寧 [ 54 ]。
據報導， C. frondosa的不同身體部位（肌肉、性腺、消化道和呼吸器官）含有大量酚類物質（22.5 至 236.0 毫克沒食子酸當量 (GAE)/100 克乾重）和類黃酮（ 2.9 至 59.8 mg 蘆丁當量/100 g dw)，氧自由基吸收能力 (ORAC) 值為 140 至 800 µmol Trolox 當量/g dw [ 16 ]。此外，同一項研究表明，使用富含乙腈的餾分和乙酸乙酯提取物從消化道中獲得了最高水平的酚類物質，而當考慮富含水和富含乙腈的餾分時，在性腺中發現了最高含量的類黃酮。同樣，Zhong 等人。[ 54 ]報導說，C. frondosa在再水化海參（主要是內臟器官）中顯示出最高的 ORAC（2.60 ± 0.04 mmol Trolox 當量/g dw）和 2,2-二苯基-1-苦基肼 (DPPH)（7.48 ± 0.10 µmol Trolox 當量/g dw）活性) 與新鮮對應物相比，而新鮮的C. frondosa與再水化樣品相比，無論有無內部器官，都含有大量的酚類物質 (1.08 mg GAE/g dw)。在另一項研究中，Mamelona 和 Pelletier [ 96 ] 描述了C. frondosa的內臟與異丙醇、甲醇和水提取物相比，在 60 °C 下通過壓力液體提取 (PLE) 方法提取，在乙醇提取物的 ORAC 測定中表現出最高的抗氧化活性。此外，同一項研究表明，PLE 可以通過乙醇、異丙醇、甲醇和水更好地提取 α-生育酚 (220 µg/g)、總類胡蘿蔔素 (60 mg/g) 和總酚類 (894 µg/g)在 60°C。此外，從C. frondosa的不同身體部位提取了游離、酯化和不溶性結合的酚類物質，並確定了它們的抗氧化活性。結果表明，游離部分是所有選定身體部位中最主要的酚類物質形式。此外，在觸手（花）中檢測到的酚類物質和抗氧化性能最高，其次是內臟器官和體壁 [ 97 ]。
據報導，海參（Holothuria atra和Holothuria arenicola）中的主要酚類化合物是綠原酸（高達 93 wt%），但存在的其他酚類化合物包括鄰苯三酚、香豆酸、蘆丁和兒茶素 [ 98 ]。然而，據我們所知，沒有其他關於C. frondosa中酚類物質概況的已發表報告。
6. 潛在的生物活性和藥用作用
海參在全球範圍內被公認為民間藥物和傳統食品，尤其是在東亞地區。然而，其具體成分及其生物學功能尚待研究。到目前為止，已經研究了其抗血管生成、抗血栓形成、抗凝血、抗癌、抗腫瘤、抗炎、抗高血壓、抗真菌、抗菌和抗氧化特性。此外，它已被用於治療哮喘、胃潰瘍、風濕病、腎臟疾病、傷口癒合、滋補身體和作為保濕劑。C. frondosa的生物學和藥用價值總結於表3.
6.1. 抗癌活動
大約 60% 的獲准癌症治療藥物是從植物、動物和海洋來源等天然來源中分離出來的 [ 105 ]。平均而言，已從海洋資源中鑑定出 14,000 種生物活性化合物，表明它是分離新藥理活性物質以發現新抗癌藥物的豐富領域 [ 106 ]。1952 年，Nigrelli [ 107 ] 首次描述了巴哈馬海參 ( Actinopyga agassizi ) 苷的抗癌活性。後來，對許多海參物種的抗癌機制進行了更深入的研究，主要是C. frondosa (frondoside A) (表 4).
李等。[ 108 ] 描述了C. frondosa的新型萜類化合物（frondoside A）通過級聯激活和線粒體途徑促進細胞凋亡，顯示出對胰腺癌細胞的生長抑制特性。此外，劉等人。[ 25 ] 研究了來自C. frondosa的低分子量岩藻糖基化硫酸軟骨素 (LFCS) 的抗癌活性並證明 LFCS 以劑量依賴的方式顯著抑制 Lewis 肺癌的生長和轉移。此外，LFCS 顯著抑制了 ERK1/2/p38 MAPK/NF-kB 通路的激活，該通路在基質金屬蛋白酶的表達中起著關鍵作用。此外，抗癌機制與 p53/p21 誘導的細胞週期停滯、血管內皮生長因子介導的血管生成、caspase-3 誘導的細胞凋亡和金屬蛋白酶組織抑製劑/基質金屬蛋白酶介導的 ERK1/2/p38 轉移有關。 MAPK/NF-kB 通路。然而，Al Shemaili 等人。[ 101] 調查了 frondoside A 與吉西他濱對胰腺癌的影響（AsPC-1 和 S2013），並表明 frondoside A（100lg/kg/天）和吉西他濱（4 mg/kg/劑量）的組合比單一藥物單獨。在另一項研究中，Al Shemaili 等人。[ 109 ] 比較了葉苷 A 與葉苷 B 和 C，以及糖苷配基化合物對生長的抑製作用；結果表明，frondoside A 是比其他 frondosides 更有效的抗癌劑。此外，frondoside A 顯著抑制胰腺癌細胞的生長（EC 50 ~ 1 μM），而 frondoside B 的效果較差（EC 50~2.5 μM)，葉苷 C 和糖苷配基沒有活性。此外，frondoside A 以 100 μg/kg/天的劑量可顯著抑制小鼠癌症異種移植物的生長。
另一項研究描述了從C. frondosa提取物中分離出的 frondanol A5，並建議將其作為一種可能的結腸癌化學預防劑 [ 110]. 他們使用異常的結腸隱窩病灶作為衡量表達增殖的功效標記，HCT-116 細胞系中的 frondanol A5 (10–120 μg/mL) 也用於其凋亡和生長抑製作用。在這方面，150 和 450 ppm 的 frondanol A5 的膳食給藥減少了總結腸異常隱窩病灶的形成，這是由偶氮甲烷（約 34 至 55%）和多隱窩異常病灶（約 48 至 68.5%）引起的，呈劑量依賴性方式。Frondanol A5含有多種抗癌物質，如單硫酸化三萜糖苷frondoside A、EPA、二硫酸化frondoside B、12-甲基十四烷酸、三硫酸化frondoside C、岩藻糖基硫酸軟骨素等。另一方面，Roginsky 等人。[ 111] 研究了 frondanol-A5P 的活性，這是一種來自C. frondosa的極性組分，對 S2013 和 AsPC-1 人胰腺癌細胞的抗癌作用。結果，frondanol-A5P 在兩種細胞系中抑制增殖並在 G 2 /M 期啟動細胞週期停滯，同時細胞週期蛋白 A、細胞週期蛋白 B 和 cdc25c 的表達下降。此外，frondanol-A5P 顯著改善了膜聯蛋白 V 結合併啟動了 caspase-3。
Frondoside A 已被研究用於治療乳腺癌，並被認為是抑制乳腺癌的潛在來源。Al Marzouqi 等人。[ 112] 使用人雌激素受體 (ER) 陰性的 MDA-MB-231 細胞乳腺癌細胞檢測了葉苷 A 對人乳腺癌細胞存活、裸鼠腫瘤生長以及體外遷移和侵襲的影響。結果表明，frondoside A 通過增加 p53，然後誘導乳腺癌細胞中的半胱天冬酶 3/7 和 9 細胞死亡途徑，改善亞 G1（凋亡）細胞部分。此外，frondoside A（腹膜內註射 100 μg/kg/天，持續 24 天）可顯著降低無胸腺小鼠腫瘤異種移植物的生長，且無任何毒性作用。因此，frondoside A 可能會增加化療藥物紫杉醇對乳腺癌細胞的抑製作用。另一方面，frondoside A 可能對具有細胞系 66.1 的轉移性乳腺癌同基因小鼠模型具有抗轉移特性。此外，3H-PGE2 結合測定表明，frondoside A 激發了 PGE2 與兩種受體（EP2 和 EP4）的結合，而 EP4 受體顯示出更高的親和力。此外，frondoside A（0.1 和 1.0 μM）抑制腫瘤細胞響應 EP2 或 EP4 受體的遷移 [113 ]。在另一項研究中，Park 等人。[ 114 ] 研究了 frondoside A 對人乳腺癌細胞的抗侵襲性，並建議將 frondoside A 作為轉移性乳腺癌的抗癌劑。發現葉苷 A 顯著降低了 TPA 誘導的集落形成和侵襲以及 MBA-MB-231 人乳腺癌細胞的遷移。
據報導，frondoside A 可能抑制肺癌，包括 LNM35、NCI-H460-Luc2 LNM35、NCI-H460-Luc2 和 A549，以及乳腺癌，包括 MDA-MB-435、HepG2 和 MCF-7 細胞以 0.01–5 µM 注射時的增殖。此外，當 frondoside A 以 0.01 和 1 mg/kg 注射到患有 LNM35 肺癌細胞的無胸腺小鼠中時，在治療 25 天后，腫瘤體積分別減少了 41% 和 43%。此外，frondoside A 在體外誘導細胞遷移、血管生成和侵襲的抑制 [ 115 ]。另一方面，Jin 等人。[ 116 ]比較了frondoside A與cucumarioside A 2 -2（來自Cucumaria japonica) 對細胞死亡誘導能力的影響，並報導了 frondoside A 和 cucumarioside A 2 -2 通過誘導細胞凋亡顯示出抗白血病活性。然而，frondoside A 誘導的細胞凋亡比cucumarioside A 2 -2 誘導的細胞凋亡更明顯和更快。
6.2. 抗腫瘤活性
抗腫瘤化合物在腫瘤發展、轉移和進展的不同階段起著至關重要的作用。美國國家癌症研究所進行了一項為期 15 年的調查，報告稱 4% 的海洋生物含有抗腫瘤成分 [ 24 ]。C. frondosa等海參含有多種抗腫瘤成分，對腫瘤生長顯示出顯著的抑製作用 [ 112 ]。據報導，當使用 frondoside A 時，使用 MDA-MB-231 乳腺癌細胞的小鼠模型的腫瘤體積減少了 87% [ 113 ]。根據 Janakiram 等人的說法。[ 118]，frondanol A5 通過增強針對腫瘤和細胞凋亡的先天免疫反應來抑制腸道腫瘤。此外，巨噬細胞在治療組中表現出增加的 GILT 表達，導致腫瘤中炎性細胞因子的調節。這是因為 frondanol A5 負責改善 APC Min/+小鼠的免疫反應以及抑制腸道腫瘤。在另一項研究中，劉等人。[ 25 ] 從C. frondosa的體壁分離出低分子量岩藻糖基化硫酸軟骨素，並提出它在體內以劑量依賴的方式顯著減少腫瘤體積和重量。此外，LFCS 的抑制率（1、5 和 20 mg/kg）分別為 25.8、33.1 和 47.2%。阿維洛夫等。[83 ] 還研究了 frondoside C，一種來自C. frondosa的新三萜糖苷，用於確定細胞系 P-388、A-549、HT-29 和 Mel-28 中的抗腫瘤活性。在另一項研究中，Wang 等人。[ 119 ] 從C. frondosa和H. scabra中分離出 13 種三萜糖苷，並評估了它們的細胞毒活性。結果表明，糖鏈中糖基殘基的數量以及糖苷配基中的側鏈可能影響它們對腫瘤細胞的細胞毒性並呈現選擇性細胞毒性。根據另一項研究，從C. frondosa中提取磷脂，並製備脂質體 [ 120]. 結果表明，脂質體在體外具有抗腫瘤作用，並在小腸上皮細胞模型中表現出高轉運和攝取作用。此外，脂質體通過減少腹水液量和殺死腹水腫瘤細胞，延長了 S180 腹水瘤小鼠的壽命。
6.3. 抗血栓和抗凝活性
抗血栓劑減少血栓的形成，而抗凝劑降低血液凝結的能力。海參體壁中岩藻糖化硫酸軟骨素 (FCS) 的存在與抗凝血和抗血栓形成活性有關。據報導，抗凝血特性通常取決於多醣的硫酸鹽含量、位置和分子大小、鏈構象和單醣組成[ 99、121 ]。然而，劉等人。[ 99 ] 從C. frondosa和 Cu 2+中分離出 FCS催化自由基解聚製備低分子量片段。通過核磁共振 (NMR) 分析了二糖成分的結構，並鑑定了不同分子量和硫酸化模式的抗血栓形成和抗凝血特性。結果表明，與大鼠模型中的天然 FCS 相比，FCS 的低分子量片段表現出更好的抗凝血和抗血栓形成特性。此外，相對於硫酸化模式，分子量和硫酸化程度對抗凝血和抗血栓形成的影響更為顯著。
6.4. 抗高血糖活動
糖尿病是一種慢性疾病，會導致腎衰竭、失明、截肢、中風和增加患冠狀動脈疾病的風險。橙足海參 ( C. frondosa ) 提取物已顯示出潛在的抗糖尿病和降糖活性。胡等。[ 104 ] 從C. frondosa中分離出富含 EPA 的磷脂酰膽鹼並表明通過上調胰島素介導的磷脂酰肌醇 3 激酶 (PI3K)/蛋白激酶 B (PKB) 信號通路具有顯著的抗高血糖特性。此外，磷脂酰膽鹼顯著降低血糖水平，而在糖尿病大鼠的糖原合成和胰島素分泌中觀察到相反的情況。此外，RT-PCR 分析表明，磷脂酰膽鹼顯著刺激腓腸肌中胰島素受體、蛋白激酶 B、磷酸肌醇 3-激酶、胰島素受體底物 1 和葡萄糖轉運蛋白 4 的糖代謝相關基因的表達。另一項研究揭示了從C. frondosa中分離出褐藻糖膠, 並通過激活骨骼肌和脂肪組織中的磷脂酰肌醇 3 激酶 (PI3K)/蛋白激酶 B (PKB) 通路和葡萄糖轉運蛋白 4 (GLUT4) 來檢測其抗高血糖活性 [ 70 ]。結果表明，褐藻糖膠顯著降低了空腹血糖和胰島素水平，而胰島素抵抗小鼠的胰島素和葡萄糖耐量則相反。此外，RT-PCR 分析表明，褐藻糖膠提高了胰島素受體底物 1、胰島素受體、PI3K、PKB 和 GLUT4 的 mRNA 表達。
胡等。[ 122 ] 從C. frondosa的體壁中分離出岩藻糖基化的硫酸軟骨素，並研究了 FCS 和羅格列酮 (RSG) 的組合對高脂肪高蔗糖餵養小鼠葡萄糖代謝的影響。結果表明，與 FCS 或 RSG 相比，FCS 和 RSG 的組合顯著改善了肝臟重量、體重增加、空腹血糖水平、血清胰島素水平、口服葡萄糖耐量試驗的葡萄糖耐量、肝醣原含量和穩態模型評估指標獨自的。胡等。[ 123 ] 還確定了從C. frondosa分離的岩藻糖基化硫酸軟骨素 (FCS) 的作用對抑制胰島素抵抗小鼠胰島細胞凋亡的影響，表明 FCS 顯著修復了高脂高糖飲食損傷的胰島，降低了胰島素、血糖、TNF-α 水平，並提高了脂聯素水平。同樣，胡等人。[ 58 ] 檢查了來自C. frondosa的岩藻依聚醣對胰島的影響，並報告說它顯著防止高脂肪高蔗糖飲食 (HFSD) 損傷胰島，降低胰島素、血糖和 TNF-α 水平，同時脂聯素水平升高。
6.5. 免疫調節活動
Frondoside A（單硫酸化戊糖苷）是一種從C. frondosa中鑑定出的糖苷化合物，當以亞毒性劑量給藥時具有免疫調節活性 [ 100 ]。此外，當給 Balb C 小鼠腹膜內施用葉糖苷 A（0.2 微克）時，與載體處理的對照相比，處理動物中巨噬細胞的溶酶體活性顯著增加。因此，frondoside A 提高了基於細胞的免疫力，這有助於增加先天免疫反應並抑制腫瘤生長。羽衣甘藍等人的另一項研究。[ 56 ]揭示了海參衍生（C. frondosa）硫酸化多醣提取物的免疫調節作用，並報導單醣成分包括N-乙酰神經氨酸、N-乙酰葡糖胺、甘露糖、半乳糖、岩藻糖和N-乙酰半乳糖胺 (40:13:12:12:9:8:3)，被發現在成熟的樹突細胞中具有活性並導致 Th17 信號傳導增加。另一方面，Janakiram 等人。[ 118 ] 表明，frondanol A5 提高了 GILT 的表達以及巨噬細胞的吞噬作用，並減少了炎症性血管生成分子，這可能會增強治療小鼠的先天免疫系統。
6.6. 抗炎活動
抗炎劑是減少炎症的物質。由於生物活性化合物（包括生物活性肽）的存在，海參具有潛在的抗炎特性 [ 5 ]。此外，來自C. frondosa的硫酸化多醣（ N-乙酰神經氨酸）可能會影響樹突狀細胞的成熟，從而最終顯示出抗炎活性 [ 56 ]。在另一項研究中，Stefaniak-Vidarsson 等人。[ 94 ] 指出，來自C. frondosa的硫酸化多醣（FCF-1、FCF-2 和 FCF-3）可能對 THP-1 巨噬細胞具有功能活性和抗炎特性。此外，還評估了 ORAC，收集細胞培養基並檢查抗炎 (IL-10) 和促炎（TNF-α 和 IL-6）細胞因子的存在。此外，FCF-1、FCF-2 和 FCF-3 (0.1–100 µg/mL) 誘導了 TNF-α、IL-10 和 IL-6 的水平，證明了它們對 THP-1 巨噬細胞的功能活性。此外，Subramanya 等人。[ 124 ] 報導，從C. frondosa獲得的非極性提取物 frondanol在 DSS（葡聚醣硫酸鈉）誘導的結腸炎小鼠模型中表現出抗炎活性。
6.7. 抗氧化活性
如今，海洋天然抗氧化劑備受關注。特別是，海參被認為是具有多種生物活性的有價值的抗氧化劑的可能來源。抗氧化特性可以通過具有各種作用機制的各種測定法進行分析，主要是氫原子轉移 (HAT)、還原力、單電子轉移 (SET) 和金屬螯合 [ 125 ]。羥基自由基可以與蛋白質、氨基酸和 DNA 發生反應，從而引發脂質過氧化反應 [ 126 ]。因此，消除羥基自由基可能是系統抗氧化最有效的防禦措施之一 [ 127]. 此外，DPPH是一種穩定的自由基，負責通過氫或給電子機制清除自由基，成為穩定的抗磁性分子[ 127 ]。嚴等。[ 95 ] 通過使用不同的酶分析了C. frondosa的抗氧化活性，並指出胰蛋白酶和 Flavourzyme 其次是鹼性蛋白酶獲得了最高量的羥基自由基清除活性 (27.4%) 和 DPPH 自由基清除活性 (14.42%)。此外，Mamelona 等人。[ 93 ] 從棘皮動物的副產品中製備了蛋白水解物，並報導了C. frondosa的內臟與綠海膽的消化道相比，最高 ORAC 值（421 µmol Trolox 當量/克）如何。此外，水解物表現出抑制脂質氧化（> 50%），抗氧化活性的原因可能是由於水解物中存在抗氧化肽。在另一項研究中，Wu 等人。[ 128 ] 檢測了來自葉海棠的富含二十碳五烯酸的磷脂 (EPA-PL)對叔丁基氫過氧化物和過氧化氫誘導的 PC12 細胞氧化損傷的影響。結果表明，與叔叔相比，EPA-PL 減少了乳酸脫氫酶的滲漏，提高了細胞內總抗氧化活性和超氧化物歧化酶能力-丁基過氧化氫或過氧化氫。此外，它憑藉其抗氧化特性揭示了神經保護活性，這可以通過抑制線粒體依賴性細胞凋亡途徑來實現。
6.8. 抗菌活性
由於存在多種關鍵酶，橙足海參的提取物顯示出潛在的抗菌活性。豪格等人。[ 129 ] 檢查了橙足海參不同身體部位的抗菌活性，並報告說，與體壁提取物相比，葉狀海參的卵顯示出顯著更高的抗菌性能。此外，在海參的體壁提取物中觀察到溶血活性。在體腔細胞中也發現了抗菌活性，主要針對革蘭氏陽性菌，這表明海洋棘皮動物，尤其是葉狀棘皮動物是發現新型抗生素的可能來源。同樣，Beauregard 等人。[ 32] 從C. frondosa的體腔液中鑑定出一種新型抗菌肽，並發現它對革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌具有廣泛的抗菌活性。在另一項研究中，Tripoteau 等人。[ 130 ]評估了從C. frondosa副產品中提取的酶水解物的抗病毒活性，並聲稱它可以作為抗單純皰疹病毒藥物的潛在來源。病毒 1. 海參三萜甙由於作用靶點是5,6-不飽和細胞膜甾醇，所以不具有抗菌活性。然而，大多數海參苷是強大的抗真菌劑。不幸的是，儘管葉苷 A 的結構非常接近強效抗真菌成分，但從未對它的抗真菌活性進行過測試 [ 131 ]。
6.9. 抗血管生成活性
抗血管生成劑可以破壞轉移腫瘤所需的血管網絡。海參可能是抗血管生成化合物的來源，尤其是海參。岩藻糖基化硫酸軟骨素 (FCS) 是具有抗血管生成活性的最重要成分之一。Collin [ 132 ] 從C. frondosa的花和體壁分離出 FCS，並報導 FCS 與作為陽性對照的氫化可的松/肝素甚至鯊魚軟骨 CS6 相比具有相對更高的抗血管生成活性。在另一項研究中，Attoub 等人。[ 115 ] 描述了葉黃苷 A 負責血管生成，如 LNM35 肺癌異種移植物中 CD31 染色減少所示，沒有毒副作用。
6.10. 抗高血壓活動
海參潛在的抗高血壓和血管緊張素轉換酶 (ACE) 抑制活性最近受到了很多關注。海參的體壁蛋白顯示出抗高血壓特性。Hamaguchiet 等人。[ 133 ] 評估了不同加工的冰島海參的抗氧化和抗高血壓特性。C. frondosa分離為皮膚、肌肉、呼吸道和消化道，並通過多種方式進行水提和水解，以評估 ACE 抑制活性、ORAC 值、金屬離子螯合活性和還原能力。結果表明，與水解產物相比，水提取物具有顯著更高的 ACE 抑製作用。此外，水解產物比水提取物表現出更高的 ORAC 值。
6.11. 其他活動
除了已經描述的那些之外，橙足海參還展示了潛在的生物活性。例如，張等人。[ 134 ] 聲稱富含 EPA 的C. frondosa磷脂負責脂肪燃燒，可用作治療肥胖症的功能性食品。在另一項研究中，Hui 等人。[ 135 ] 描述了與腦苷脂和神經酰胺相比，來自C. frondosa的鞘脂能夠通過長鏈鹼基 (LCB) 抑制 3T3-L1 細胞（源自小鼠 3T3 細胞）的增殖和分化。同樣，Jia 等人。[ 136 ] 從C. frondosa中分離出的葡萄糖腦苷脂系列（CFC-1、CFC-2 和 CFC-3）、神經酰胺和長鏈鹼基, 並報導了葡萄糖腦苷脂系列、神經酰胺和長鏈鹼基對細胞增殖具有抑製作用。此外，與其他葡糖腦苷脂相比，CFC-3 是對 HepG-2 細胞活力最有效的化合物。在另一個實驗中，Tian 等人。[ 137 ] 檢查了來自C. frondosa的長鏈鹼基的抗脂肪形成活性，並顯示抑制脂肪細胞分化和 CCAAT/增強子結合蛋白以及過氧化物酶體增殖物激活受體 γ 的表達。另一方面，Yan 等人。[ 95 ] 從C. frondosa生產各種蛋白質水解物使用幾種商業酶（胰蛋白酶、Alcalase、Flavourzyme、Neutrase、木瓜蛋白酶和菠蘿蛋白酶）對內臟進行了研究，並報導了使用 Flavourzyme 和 Neutrase 製備的水解產物具有更好的發泡性能（發泡能力和發泡穩定性）。此外，木瓜蛋白酶和菠蘿蛋白酶衍生的水解產物表現出比其他蛋白酶更好的乳化活性。此外，林等人。[ 138 ]通過酶解法製備了葉狀C. frondosa水解產物，並分析了對果蠅和D-半乳糖誘導的衰老小鼠的抗衰老作用。結果表明，C. frondosa水解產物含有低分子量肽，通過表達 Klotho、防止脂質過氧化和蛋白質氧化、增加超氧化物歧化酶 (SOD) 和穀胱甘肽過氧化物酶 (GSH-Px) 的活性以及下調乙酰膽鹼酯酶活性。
本文使用Google翻译于美国国家医学图书馆期刊https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7281287/